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黑木耳胞外多糖对小鼠肠道微生态及免疫调节的影响(二)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-17 16:49:39 关注: 0 次
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2結果与剖析

2.1木耳胞外含糖量红外光谱分析评定

每升木耳发酵物能获取含糖量244mg,纯净度为85.3%,FT-IR光谱仪表明,木耳胞外含糖量为具备典型性β-吡喃糖构造的繁杂含糖量(图1),官能团异构分析表明,在3419cm-1处的宽峰是-OH伸缩式震动消化吸收峰,2973cm-1和2918cm-1处的弱消化吸收带是-CH伸缩式震动消化吸收峰,1735cm-1和1638cm-1处的消化吸收峰说明带有糖醛酸,1383cm-1是-CH弯折震动消化吸收峰,1078cm-1和1048cm-1处的消化吸收峰是C-O-H和C-O-C中的C-O造成的振荡消化吸收;880cm-1是β-糖苷键的特点消化吸收峰。

2.2木耳胞外含糖量的单糖构成剖析

木耳胞外含糖量历经酸水解反应和衍化化时,运用HPLC剖析其单糖构成。数据显示,葡萄糖水和麦芽糖醇为其具体的单糖成分(摩尔质量之比53.85%和25.05%),也有少许的甘露糖、葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖和葡萄糖醛酸(表1)。与红外线定量分析結果一致,木耳胞外含糖量是由多种多样单糖成分组成的杂合含糖量。

2.3木耳胞外含糖量对小白鼠休重及脏体比的危害

与实验组对比,灌胃木耳胞外含糖量后小白鼠休重无显著转变(图2)。内脏器官指数是体现动物器官生长发育的主要指标值,可直接体现受试物对小动物存有的危害功效。本分析根据称重小白鼠各内脏器官机构品质,测算其内脏器官指数。木耳胞外含糖量对小白鼠内脏器官指数的危害见表2,数据分析表明,试品组和对比結果无显著性差异(P>0.05)。以上实验说明,灌胃木耳胞外含糖量不容易造成小白鼠内脏器官产生生理性出现异常。

2.4木耳胞外含糖量对小白鼠肠菌的危害

本实验运用微生物菌种16SrRNA高通量测序技术性,探寻了灌胃木耳胞外含糖量小白鼠肠菌的变动状况。转录组测序所得的原始记录经挑选过虑后,对得到的队列开展可实际操作模块剖析(OTU)合并区划,选用Greengenes数据库开展注解,根据多种多样多自变量应用统计学分析工具对不一样样版(组)微生物菌种群落结构差别开展剖析,获得了小白鼠肠道微生物16SrRNA在属水准OTU编码序列的相对丰度(图3)。根据Metastats对样版小组之间编码序列量差别的较为检测发觉,与实验组对比,拟杆菌属和罗氏菌属明显提升(P<0.05),拟杆菌属在含糖量组肠道微生物群中占(10.31±1.5)%,而对照实验为(5.4±1.38)%;罗氏菌属在含糖量组里占(0.17±0.07)%,而在对照实验中未监测到。

2.5木耳胞外含糖量对小白鼠肠胃短链脂肪酸成分的危害

肠道微生物根据膳食纤维素的发醇和短链脂肪酸(SCFAs)的形成来提升能量利用率,进而提升寄主新陈代谢高效率。本实验将小白鼠排泄物试品依照低温干燥排泄物试品,精确称量50mg试品,添加1.2mL聚磷酸盐缓冲溶液(pH7.3)搅拌,4℃14000r/min离心式20min,汲取上清液至5mL离心管架中。每200μL上清添加0.1mL的稀释液后盐酸(摩尔分数50%),充足搅拌3min,用2mL二氯甲烷(色谱仪级)开展提纯,4℃静放2h,随后用0.22μm有机滤膜过虑。选用气象色谱仪(GC)检验试样中短链脂肪酸的成分,试品获取方式参考Zhao等并做一部分改动。GC剖析选用基本HP-FFAP(25m×0.32mm,0.5μm)配备柱,程序流程设置参考贾益群等在微生物试品油酸获取与解析的分析結果,并更改其分离之比20∶1。SCFA标准物质水溶液的配制及其标曲制作参考孟拓等对气象色谱仪-质谱分析联用分析法肠道炎小白鼠短链脂肪酸新陈代谢科学研究結果。

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