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奶粉中沙门氏菌和阪崎肠杆菌的测定能力验证结果分析(二)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-12 09:58:56 关注: 0 次
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3.2婴儿奶粉试品中沙门菌的检测分析

3.2.1试品中沙门菌的平板电脑分离出来

试品经2次增菌后,画线注射于BS琼脂粉平板电脑、XLD琼脂粉平板电脑和沙门菌着色平板电脑上开展分离出来塑造,結果见表2:W试品在BS、XLD及其沙门菌着色3种平板电脑上均发生异常沙门菌菌体,在其中在BS和XLD平板电脑上由此可见典型性沙门菌落③和④,而在沙门菌着色平板电脑上均为异常菌体取①和②两个菌体评定。Q试品在BS平板电脑无异常菌体,而在XLD和沙门菌着色平板电脑上无典型性菌体,很有可能是是非非典型性菌体或影响菌。

沙门氏菌属能造成非特异极强的辛脂酶,具备辛脂酶活力的影响菌有铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌和蜂窝状哈夫犬菌,这种菌在沙门菌着色培养液上面转化成暗紫色影响菌。结肠炎沙门氏菌两相加利福尼亚亚种在沙门菌着色培养液上展现因培养液生产厂家不一样而不一样深绿色到深蓝色菌体,这非常容易与其他肠杆菌搞混。杨云斌较为了沙门菌和影响菌在3种分离出来平板电脑上的特性,见表3。从表2和表3能够发觉,在BS平板电脑上,典型性沙门菌落和沙门菌关键影响菌的菌体特性非常容易区别起来,而在别的2种平板电脑上则非常容易搞混。

3.2.2婴儿奶粉试品中沙门菌生物化学和血清蛋白评定結果

因为弗氏柠檬酸钠链球菌和肠子埃希氏菌的很多抗原体与沙门菌的抗原体彻底或一部分同样,且这2种菌与沙门氏菌属O鞭毛抗原A-F确诊血清蛋白会产生交叉式凝集反应,因而血清蛋白评定阳性者务必进一步做其他生物化学评定。一般状况,做TSI和血清学评定后,只对血清蛋白评定阳性菌落进一步做事后生物化学评定。为谨慎考虑,此次对疑是呈阴性的考评试品的菌体依然干了事后生物化学评定。

W和Q试品平板电脑分离出来出的6种异常菌体TSI和血清蛋白学评定結果见表4。表4说明,W试品在沙门菌着色平板电脑上分离出来到的暗紫色异常菌体中两个菌体(菌体①和②)为血清学评定呈阴性,而在BS和XLD 两个平板电脑上挑出来的2个异常菌体(菌体③和④)血清学评定呈阳性,且生物化学评定合乎,判断为沙门菌验出,菌体①②③和④归属于同一试品,因此①②不必生物化学再评定。Q试品在XLD平板电脑上的异常菌体(菌体⑤和⑥)经生物化学和血清蛋白评定,結果为非沙门菌。在功能考评中,验出呈阳性的分辨比呈阴性试品的要非常容易,而针对众多形状异常菌体的呈阴性试品,需对异常菌体逐一评定,不然易犯错误。

3.3婴儿奶粉试品中阪崎肠杆菌的检测分析

3.3.1平板电脑分离出来

阪崎肠杆菌古代历史一直被误以为是淡黄色阴沟肠杆菌,因而二者相互之间影响菌;阪崎肠杆菌着色平板电脑是借助其α-葡萄糖苷酶呈阳性,在TSA中添加XαGlc(5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-葡萄糖水苷酸),α-葡萄糖苷酶功效于XαGlc进而阪崎肠杆菌转化成非特异深蓝色菌体。试品V在阪崎肠杆菌着色平板电脑发生异常深蓝色菌体(表5),因此挑菌10个异常菌体于1 mL无菌检测盐水中,稀释液搅拌后在TSA画线分离出来塑造,依靠高倍放大镜观查菌体,結果发生2种菌体,有淡黄色菌体和浅黄粉红色菌体,再进一步做生物化学评定。试品G无阪崎肠杆菌异常菌体,算为未验出。挑菌异常菌体是关键因素,挑菌的具体位置和数量尽量扩大捕获几率,假如心存侥幸读取2~3个异常菌体,则有可能会漏验。

3.3.2生物化学评定

对试品V在TSA平板电脑上生长发育的2种菌体⑦和⑧开展生物化学评定,如表6,结果显示,异常菌体⑦产黄色素,抗霉素、山梨糖醇、磷酸氢钙呈阴性,精氨酸双核糖核苷酸、鼠李糖、绵白糖、蜜二糖、苦杏仁甙呈阳性,评定結果合乎阪崎肠杆菌生物化学特点。菌体⑧的生物化学评定結果不符阪崎肠杆菌生物化学特点。不难看出,α-葡萄糖苷酶呈阳性是阪崎肠杆菌的特性,可是并不是唯一;阪崎肠杆菌着色培养液对阪崎肠杆菌的非特异是有局限的,这与吴清平等的阐述一致。当在着色平板电脑上发觉有异常菌体,若评定为弱阳时,要用全排列组合问题,不然很容易发生假阴性。

3.4婴儿奶粉试品中沙门菌和阪崎肠杆菌检验結果

W试品验出沙门菌,Q试品未验出沙门菌;V试品验出阪崎肠杆菌,G试品未验出阪崎肠杆菌,检验結果令人满意。

4结果和探讨

在分离出来辨别沙门菌时,BS平板电脑具备关键的关键性功效,而其他2种平板电脑上很容易受影响菌的危害,只有起輔助辨别功效。这一结果与与杨云斌等的“沙门着色培养液的分离出来评定实际效果最好是”的依据不一样,但与国家行业标准GB4789.4-2016的技术标准中心思想一致。

辛脂酶是沙门菌着色塑造挑选设计方案的关键根据,其对沙门菌的精确度和特异度各自为100%和84.09%。此次试验中,W试品在着色平板电脑上显著全是沙门菌异常菌体,选择两个菌体试验可是血清蛋白评定結果则是呈阴性,缘故是表明辛脂酶阳性菌除开大部分沙门菌外,也有铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌、蜂窝状哈夫犬菌、莹光假单孢菌和恶臭味假单孢菌等。

除此之外,在本次试验中本试验室还累积了二点工作经验:第一,在打算全过程中,有心设计方案了二种规范菌互动塑造和剥离的试验,关键目标为学习知识,提高鉴别工作能力。第二,能力验证试品有别于一般食品类样,应考全过程针对典型性菌,一般作业者不易犯错误,确诊相对性非常容易;但针对非典型菌,则必须 细心作出事后评定,而无法随便得出结论;针对初筛是疑是阳性者事后评定为弱阳时,则需增加异常菌的评定,必需时要全排列组合问题。

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