④抽抽用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物，挥发残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解，如水溶性盐类、糖类等，使得测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干时也有引起爆炸的危险。

⑤如果没有无水乙醚可以自己制备，制备方法如下：在100mL乙醚中，加入无水石膏50g，振摇数次，静置10h以上，蒸馏，收集35ºC以下的蒸馏液，即可应用。

⑥乙醚中过氧化物的检查方法：取10mL乙醚，加2mL10%的碘化钾溶液，用力振摇，放置1min，若出现黄色，则证明有过氧化物存在。

⑦乙醚的处理：在乙醚中加入1/20～1/10体积的硫代硫酸钠溶液(200g/L)洗涤，再用水洗，然后加入少量无水氯化钙或无水硫酸钠脱水，于水浴上蒸馏，蒸馏温度略高于溶剂沸点，能达到烧瓶内沸腾即可。弃去最初和最后的1/10馏出液，收集中间馏出液备用。

⑧提取时水浴温度不可过高，以从冷凝管滴下80滴/min左右，回流6～12次/h为宜，提取过程应注意防火。

⑨在抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，这样，可防止空气中水分进入，也可乙醚挥发在空气中，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。

⑩抽提是否完全，可凭经验，也可用滤纸或毛玻璃检查，将抽提管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下油迹表明已抽提完全。

⑪在挥发乙醚或石油醚时，切忌用直接火加热，应该用电热套、电水浴等。烘前应驱除全部残余的乙醚，因乙醚稍有残留，放入烘箱时，有发生爆炸的危险。另外，因为乙醚是麻醉剂，要注意室内通风。

⑫反复加热会因脂类氧化而增重。如质量增加，以增重前的质量作为恒重。

三、酸水解法

1、原理

样品经酸水解，使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来，用乙醚提取脂肪，然后在沸水浴中回收和除去溶剂，称重而获得游离和结合的脂肪含量。

2、试剂

①盐酸。

②乙醇(95％)。

③乙醚。

④石迪醚(30～60ºC沸程)。

3、仪器

①100mL具塞量筒。

②干燥器。

③恒温水浴锅。

4、操作方法

（1）固体样品：

①固体样品：精密称取约2.00g，置于50mL大试管内，加8mL水，混匀后再加10mL盐酸。

②液体样品：称取10.00g，置于50mL大试管内，加10mL盐酸。

(2)样品测定：将试管放入70～80℃水浴中，每隔5～10min以玻璃棒搅拌一次，至样品消化完全为止。40～50min后，取出试管，加入10mL乙醇，混合。冷却后将混合物移入100mL具塞量筒中，以25mL乙醚分次洗试管，一并倒入量筒中，待乙醚全部倒入量筒后，加塞振摇lmin，小心开塞，放出气体，再塞好，静置12min，小心开塞，并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10～20min，待上部液体清晰，吸出上清液于已恒重的锥形瓶内，再加5mL乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干，置95～105℃烘箱中干燥2h，取出放干燥器内冷却0.5h后称量，重复上述操作直至恒重。

5、计算

X=（m₁-m₀)*100 /m₂          

式中：X——样品中脂肪的含量，g/100g；

m₁——锥形瓶和脂肪的质量，g；

m₀——锥形瓶的质量，g；

m₂——样品的质量，g；

6、说明及注意事项

①本法为GB/T5009.6—2003《食品中脂肪的测定》第二法。本法适用于各类食品中脂肪的检测，特别是加工后的混合食品及容易吸湿、结块、不易烘干的食品，不能采用采用索氏抽提法时，用此法效果较好。

②鱼类、贝类和蛋品中含有较多磷脂，与盐酸一起加热时，磷脂几乎完全分解为脂肪酸和碱，导致测定值偏低，故本法不宜用于测定含有大量磷脂的食品。因糖类遇强酸容易炭化而影响测定结果，所以此法也不适用于含糖量高的食品。

③固体样品必须充分磨细，液体样品必须充分混匀，以便充分水解。避免因结合态脂肪不能完全水解，致使结果偏低，同时在提取时发生乳化现象。

④水解时应防止大量水分损失，使酸浓度升高。

⑤水解后加入乙醇可使蛋白质沉淀，降低表面张力，促进脂肪球聚合，同时可溶解一些碳水化合物、有机酸等。用乙醚提取脂肪时，因乙醇可溶于乙醚，所以加入石油醚，来降低乙醇在乙醚中的溶解度，使乙醇溶解物留在水层，并使分层清晰。

⑥挥干溶剂后，残留物中如有黑色焦油状杂质，是分解物与水混入所致，会使测定值增大，造成误差，可用等量乙醚和石油醚溶解后过滤，再次进行挥干溶剂的操作。

四、氯仿-甲醇提取法

1、原理

将试样分散于氯仿-甲醇混合液中，氯仿、甲醇和试样中的水形成三元抽提体系，可使试样中包括结合态脂类在内的全部脂类游离出来，提取后，经过滤除去非脂成分，回收溶剂，残留脂类用石油醚提取，除去溶剂后称量即得脂肪含量。

2、试剂

①氯仿-甲醇混合液：按2:1的体积比混合(氯仿97％以上，甲醇96％以上)。

②石油醚。

③无水硫酸钠：特级，在120～135ºC干燥1～2h。

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